植物单细胞培养的程序及各步中应注意的事项
植物单细胞培养的程序及各步中应注意的事项
发布时间：2024-08-15 10:52:31
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答案：1.建立细胞株 （1）材料准备 a.确定植物种类品种 b.选择单细胞或愈伤组织或叶肉、下胚轴等 c.借助酶处理：酶的种类、浓度、处理时间都对材料有一定影响 （2）制备细胞悬浮液 a.培养基成分筛选 b.悬浮培养，振荡次数为80~90次/min c.用200~300目钢网过滤盒离心沉降 2.选择细胞株 平板筛选 a.细胞起始密度（0.5-2.5）*105个/ml b.固体薄层培养基 c.按目标反复进行测定 3.扩大培养（或分化培养） （1）扩大培养（悬浮） （2）分化培养（固体） 抗性分析（生化分析） 4.鉴定分析 （1）扩大培养：鉴定提取：多次重复测定（生化分析） （2）分化培养：植株再生 鉴定遗传分析：抗性测定、生化分析、遗传分析
